Front Endocrinol ：新诊断Graves病患者甲巯咪唑治疗期间补充维生素D和硒的免疫调节作用

背景：Graves病(GD)是一种常见的自身免疫性疾病，促甲状腺激素受体抗体(TSHR-Ab)通过促甲状腺激素受体(TSH-R)不适当地刺激甲状腺细胞摄取碘、增殖和合成过量的甲状腺激素。临床上，这种相互作用会导致甲状腺机能亢进和甲状腺肿，并可能伴有甲状腺外表现，最常见的是GD眼眶病(GO)。硫代酰胺抗甲状腺药物(ATD)是治疗GD的常见一线药物，它抑制甲状腺激素的合成，但对导致疾病的免疫失调几乎没有直接影响，因此必然会导致高复发率。研究的一个关键和未实现的目标是确定针对导致该疾病的免疫机制的药物治疗。

GD的发生是由于T和B细胞的异常激活，最终导致TSHR-Ab和其他介质的产生，如趋化因子和细胞因子，参与自身免疫性炎症。在正常人中，T调节(Treg)细胞参与控制自身反应性免疫细胞，从而防止自身免疫性疾病的发展。在GD中，Treg细胞的数量很少或抑制活性有缺陷。自然杀伤(NK)细胞，特别是CD56brightCD16lowNK细胞也支持免疫调节作用。NK细胞通过整合来自抑制和激活受体的信号，快速识别和杀死因感染或恶性肿瘤而产生的应激细胞，并通过产生各种细胞因子和趋化因子或通过与其他免疫细胞的串扰来协调先天和适应性免疫反应。NK细胞在GD中的参与仍然存在争议，尽管现有的少数研究大多同意与健康人相比，GD患者脱颗粒和细胞因子释放减少。

我们最近在一项随机对照试验中报道，在新诊断的GD患者中，在低维生素D和低硒水平的患者中，补充胆钙素(VitD)和补充硒(Se)与他巴唑(MMI)相结合，在治疗的前6个月与单独补充MMI相比，显著加速了甲亢的控制(11)。我们推测，这可能至少部分是由于微量营养素对免疫反应的影响，正如基于动物和细胞系统的研究所表明的那样。

目的：为了解决这个问题，我们调查了补充硒和胆钙醇与标准的MMI治疗对我们先前研究中登记的GD患者循环Treg频率和循环NK细胞频率、NK细胞表型和功能的影响。

方法:在本研究中，我们旨在探讨治疗期间外周血T调节(Treg)和循环自然杀伤(NK)细胞频率、循环NK细胞亚群分布和功能的变化。

结果:在基线时，GD患者循环CD3-CD56+NK细胞和CD56亮NK细胞显著高于健康对照组(15.7±9.6%比9.9±5.6%，p = 0.00112.2±10.3%对7.3±4.1%，p = 0.02)；Treg细胞频率没有出现差异。GD患者中表达活化标记CD69的总NK细胞和cd56亮NK细胞的频率显著高于HC患者，而表达CD161(抑制性受体)的总NK细胞和cd56暗NK细胞的频率显著低于HC患者。当与K562靶细胞共培养时，与HC相比，GD患者的NK细胞具有显著较低的脱颗粒能力(p<0.001)。治疗6个月后，干预组和单用MMI组中的NK细胞均减少，但干预组明显更多(总NK细胞:-10.3%，CI 95%-15.8；-4.8% vs -3.6%，CI 95%-9；1.8%，p=0.09和cd56亮NK细胞:-6.5%，CI 95%-10.1；-3 vs -0.9%，CI 95%-4.4；2%，p=0.03)。与基线相比，CD69+ NK细胞显著减少，而脱粒能力略有提高，尽管两个治疗组之间没有出现差异。与基线相比，Treg细胞频率仅在干预组增加(+1.1%，CI 95% 0.4；1.7%).

图1 Graves病患者和健康对照自然杀伤细胞的表型(CD69、CD161、NKG2D、CD49d)和功能(CD107a)结果。25例年龄、性别匹配的健康供者作为对照组。直方图显示NK细胞总NK细胞、CD56bright和CD56dim亚群表达激活受体(CD69+)、抑制性受体(CD161+、NKG2D+)、整合素CD49d和具有细胞毒作用的CD107a+。数据显示为均数，t检验，*p<0.001，**p<0.0001。GD，Graves病患者；HC，健康对照组；MMI，他巴唑。NS，无统计学意义。

表1从基线到180天自然杀伤细胞和T调节细胞百分比的时间变化。

图2 Graves病患者自然杀伤细胞表型(CD69、CD161、NKG2D、CD49d)和功能(CD107a)数据。直方图显示NK细胞表达活化(CD69+)、抑制(CD161+、NKG2D+)受体、整合素CD49d和具有细胞毒作用(CD107a+)的细胞百分比。数据显示为均值(均值的标准误差)，学生t检验，p<0.05。Gd，Graves病患者；MMI，他巴唑。NS，无统计学意义。

结论：这项初步研究表明，在接受MMI治疗的GD患者中，补充维生素d和硒可以调节Treg和NK细胞的频率，与单用MMI相比，有利于更明显地减少NK细胞和增加Treg细胞。即使需要进一步的研究，也有可能推测这种免疫调节作用可能有助于在先前的研究中观察到的补充组中更迅速和更好地控制甲状腺机能亢进。

原文出处：Gallo D,  Bruno A,  Gallazzi M,et al.Immunomodulatory role of vitamin D and selenium supplementation in newly diagnosed Graves' disease patients during methimazole treatment.Front Endocrinol (Lausanne) 2023;14